本发明公开了一种氟取代含葡萄糖苷结构三氮唑类去甲斑蝥素衍生物及其制备方法与应用，该制备方法用1,3‑偶极环加成方法在去甲斑蝥素结构中C5和C6位引入1,2,3‑三氮唑，与1‑叠氮‑全乙酰基‑α‑D‑葡萄糖反应导入葡萄糖苷结构，从而合成出氟取代含葡萄糖苷结构三氮唑类去甲斑蝥素衍生物，该化合物具有多种生物活性，可用于制备抗肿瘤药物。